6、倒无菌溶液 ， 仔细检查核对溶液后 ， 面对瓶签两拇指将橡皮塞向上翻转 ， 再用一拇、食指将橡皮塞拉出 ， 用食、中指套住橡皮塞 ， 另一手（或同一只手）握住瓶签倒出少许溶液冲净瓶口 ， 再由原处倒出所需溶液于无菌容器中 ， 套上瓶塞并消毒翻转部分与瓶颈（从非污染处到污染处）后立即盖好 ， 并注明开瓶时间 。
7、打开无菌盘上层无菌巾一部分 ， 核对无菌手套袋上所注明的手套号码、灭菌日期和消毒指示胶带 ， 然后将手套袋摊开 ， 取出滑石粉包 ， 将粉擦于手掌、手背和指间 ， 以一手掀起手套内袋开口处 ， 另一手捏住手套翻折部分（手套内面）取出手套 ， 使手套的两拇指相对 ， 一手伸入手套内戴好 ， 再以戴好手套的手伸入另一手套的反折部分 ， 依法戴好另一手套 ， 将反折部分翻转套在工作服衣袖外面 ， 揭开无菌盘进行无菌操作 。
8、持无菌容器时应托住底部 ， 不可触及容器内面及边缘 。
9、开包递送无菌物品时 ， 一手托起无菌包 ， 另一手打开无菌包一角 ， 将带子卷起夹在托包的手指缝内 ， 另一手依次打开其它三角并抓住递送或稳妥地将包内物品放入无菌容器中（无菌区域内） 。
10、操作完毕 ， 从手套口翻转向下脱去手套 ， 整理用物 。
5、无菌室是什么意思？无菌室一般为4 — 5 平方米、高 2.5 米的独立小房间（与外间隔离） ， 专辟于微生物实验室内 ， 可以用板材和玻璃建造 。无菌室外要设一个缓冲间 ， 错开门向 ， 以免气流带进杂菌 。无菌室和缓冲间都必须密闭、室内装备的换气设备必须有空气过滤装置 。在获得了无菌环境和无菌材料后 ， 只有保持无菌状态 ， 才能对某种特定的已知微生物进行研究 。所以控菌能力和控菌稳定性是无菌室的核心验收指标 。业内通行的验收标准为100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落 ， 10000级洁净室平均不得超过3个菌落 ， 但由于持续稳定性难以测试 ， 所以国内工程企业经常出现3年翻新现象 ， 导致性价比缩水
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