回答使用马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml配制培养基,马铃薯去皮后切块洗净 , 加水1000毫升,文火煮沸30分钟后过滤取汁 , 将琼脂放入液体内文火煮沸 , 不断搅拌至溶解,培养基煮好后趁热分装试管,塞上棉塞,包扎塑料薄膜,放入灭菌锅,之后拿出斜放,冷却后即凝固成斜面培养基 。
一、准备用品与试剂
主要包括各种营养物质、高压灭菌锅、天平、棉塞、试管(20毫米×200毫米)、稀碱液(1摩尔/升NaOH溶液,即4克氢氧化钠溶于100毫升水)、稀酸液(1摩尔/升盐酸溶液,即84毫升浓盐酸加水916毫升)等 。
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二、培养基配方
1、马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml 。
2、马铃薯100g、麸皮100克、蔗糖20g、KH2PO4 1g,MgSO4 0.5g、琼脂20g、水1000ml 。
3、马铃薯200g、蔗糖20g、KH2PO4 2g,MgSO4 0.5g、维生素B1 20毫克、琼脂20g、水1000ml 。
三、培养基配制
1、马铃薯等块茎、植物根去皮后切块洗净,加水1000毫升 , 文火煮沸30分钟后过滤取汁,其他各种成分称量要准确,配制过程中葡萄糖要最后加入,灵芝一般要求PH5.5-6,用稀碱1摩尔/升Na〇H、稀酸1摩尔/升HC1来调整酸碱度至适度为止 。将琼脂(若为条形需剪短)放入所配液体内,文火煮沸,煮时不断搅拌至溶解 。
2、培养基煮好后趁热分装试管 , 装量为试管长度的四方之一左右,然后塞上棉塞 。倾倒时要防止培养基沾污管口,一旦沾上应用纱布擦净 。试管要事先洗净 , 严防油污 。棉塞用未脱脂普通棉花,大小、松紧适中,要求与管壁紧贴 。
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四、灭菌与培养
【灵芝苗怎么种 灵芝母种制作技术】棉塞端包扎塑料薄膜 , 放入灭菌锅,经高压灭菌后,除去包扎的薄膜 , 直立于容器或框架内,使管内水蒸气向外界散发,当温度下降至50℃左右时(取试管1支贴放脸上,很烫但能放得住,约为50℃左右),即可整捆斜放在斜面板上,斜面长度不超过管长的二分之一 , 冷却后即凝固成斜面培养基 。
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