细胞检测(细胞周期检测方法和原理)
细胞周期细胞周期是指细胞从一次分裂完成到下一次分裂结束的全过程,分为间期和有丝分裂两个阶段 。
间期分为三个阶段:早期DNA合成(G1)、晚期DNA合成(S)和晚期DNA合成(G2) 。有丝分裂,即细胞分裂,分为前期、中期、后期和后期 。
【细胞周期检测方法及原理 细胞检测】细胞周期的调节主要通过G1期的滞留来实现,G0期意味着细胞处于滞留状态 。细胞通过M期分成两部分,一部分可以继续分裂循环,一部分转入G0期 。G0期是脱离细胞周期,暂时停止分裂的时期 。但在一定的刺激下,可以进入细胞周期,合成DNA,分裂 。
G0期的特点是:①未受刺激的G0细胞仍存在DNA合成和细胞分裂的潜力;②G0细胞受刺激增殖时 , 可合成DNA,并进行细胞分裂 。细胞周期的调节主要通过G1期的滞留来实现,G0期意味着细胞处于滞留状态 。细胞通过M期分成两部分,一部分可以继续分裂循环,一部分转入G0期 。G0期是脱离细胞周期,暂时停止分裂的时期 。但在一定的刺激下,可以进入细胞周期,合成DNA,分裂 。
专有技术PI染色-流式细胞术检测细胞周期的原理:
碘化丙锭 , PI)是一种荧光染料,可嵌入双链DNA和RNA的碱基对中并与之结合,无碱基特异性 。PI与双链DNA结合后能产生荧光,荧光强度与双链DNA含量成正比 。细胞内的DNA经PI染色后 , 可以用流式细胞仪测定细胞的DNA含量 , 然后根据DNA含量的分布分析细胞周期 。
由于细胞周期不同时期的DNA含量不同,正常细胞通常在G1/ G0期有二倍体DNA含量(2N) , 在G2/ M期有四倍体DNA含量(4N) , S期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间 。PI能与DNA结合,其荧光强度直接反映细胞内DNA的含量 。因此,当用流式细胞术结合PI染色法检测细胞内DNA含量时,可以将细胞周期的各期分为G1/G0期、S期和G2/M期,并通过专用软件计算得到的流式直方图对应的各期细胞百分比 。
结果示例参考文献:a . c .谢,柯伟等“Yes相关蛋白调节阿霉素肾病足细胞周期重入和去分化”细胞死亡与疾病第10卷,12卷,915页 。2019年12月4日,doi:10.1038/s41419-019-2139-3
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