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1、将采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干净 ， 如用适当的刷子等刷洗 。把材料切割成适当大小 ， 即灭菌容器能放入为宜 。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时 ， 冲洗时间视材料清洁程度而宜 。易漂浮或细小的材料，可装入纱布袋内冲洗 。流水冲洗在污染严重时特别有用 。洗时可加入洗衣粉清洗，然后再用自来水冲净洗衣粉水 。洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物，除去脂质性的物质，便于灭菌液的直接接触 。当然，最理想的清洗物质是表面活性物质—吐温 。
【植物组织培养的过程 植物组织培养的过程简图】2、对材料的表面浸润灭菌 。要在超净台或接种箱内完成 ， 准备好消毒的烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、无菌水、手表等 。用70%酒精浸10～30秒 。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用，加之70%酒精穿透力强，也很易杀伤植物细胞，所以浸润时间不能过长 。有一些特殊的材料 ， 如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗 ， 多层鳞片的休眠芽等等，以及主要取用内部的材料，则可只用70%酒精处理稍长的时间 。处理完的材料在无菌条件下，待酒精蒸发后再剥除外层，取用内部材料 。
3、用灭菌剂处理 。表面灭菌剂的种类较多，可根据情况选取1～2种使用见表 。第四步是用无菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，视采用的消毒液种类，涮洗3～10次左右 。无菌水涮洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用注意：酒精渗透性强 ， 幼嫩材料易在酒精中失绿，所以浸泡时间要短，防止酒精杀死植物细胞 。老熟材料 ， 特别是种子等可以在酒精中浸泡时间长一些，如种子可以浸泡5分钟 。升汞的渗透力弱，一般浸泡10分钟左右，对植物材料的杀伤力不大 。漂白粉容易导致植物材料失绿，所以对于幼嫩材料要慎用 。在消毒液中加入浓度为0.08～0.12%的吐温20或80（一种湿润剂），可以降低植物材料表面的张力 ， 达到更好的消毒效果 。
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