杂交瘤细胞_杂交瘤细胞是哪两种细胞融合( 二 )


培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,通常有高温灭菌和过滤灭菌 。培养基由于富含营养物质,易被污染或变质 。配好后不宜久置,最好现配现用 。
三:杂交瘤细胞是浆细胞还是b淋巴细胞细胞培养所用的培养基是众多科研人员凭借专业知识和丰富的经验发展起来的,它一般具有以下功能:使细胞具有极佳的生长率;延长细胞寿命;有分化功能及诱导功能;支持细胞的克隆生长 。在实验中,为了使细胞具有极佳的生长速率和生长状态,实验人员会根据不同细胞的特性加入不同的因子以促进细胞的增殖 。
经典/基础培养基属于合成培养基,是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基,其主要成分有氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其他辅助成分,比如DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12,这些都是应用非常广泛的经典/基础细胞培养基 。
接下来我们一起来了解一下这些培养基以及适用的细胞类型:
01RPMI-1640 Medium:
RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基 。主要用于悬浮细胞培养 。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用 。
02Minimum Essential Medium(MEM):
也称最低必需培养基,它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素 。成分简单,可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养 。MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型,而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养 。
03DMEM-高糖(标准型):
是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养 。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养 。
04DMEM-低糖(标准型):
是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养 。低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养 。
【杂交瘤细胞_杂交瘤细胞是哪两种细胞融合】05DMEM/F12:
DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养 。F12培养基成分复杂,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点 。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养 。为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mM HEPES缓冲液 。

杂交瘤细胞_杂交瘤细胞是哪两种细胞融合

文章插图
06McCoy’s 5A:
McCoy’s 5A Medium主要为肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代移植物的生长,除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持 。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞 。
07Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM):
Guilber和Iscove将Dulbecco’Medium改良为Iscove’s Medium,用于培养红细胞和巨噬细胞前体 。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES 。并用硝酸钾取代了硝酸铁 。IMDM还能够促进小鼠B淋巴细胞,LPS *** 的B细胞,骨髓造血细胞,T细胞和淋巴瘤细胞的生长 。IMDM为营养非常丰富的培养液,因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养 。

推荐阅读