杂交瘤细胞_杂交瘤细胞是哪两种细胞融合

杂交瘤细胞中表达 。研究人员利用这些结果开发了一种 ***,可以检测在小鼠体内发现的癌症 。
一:杂交瘤细胞的筛选 *** 和原理需要经历分离筛选,然后进行扩大培养 。
用8-氮鸟嘌呤(一种嘌呤类似物)来对瘤细胞进行筛选,它可以参与核酸合成的旁路途径,但是由此合成出来的核酸不能具备正常核酸那样的功能,因此这种细胞就都会死去,能存活下来的细胞都是不能进行旁路合成核酸,该过程的本质就是为了筛选出HGPRT缺陷型细胞株 。
HGPRT缺陷型细胞株与B细胞进行融合,融合后的细胞则既能通过主要途径合成核酸,也能通过旁路合成,而未融合瘤细胞和瘤细胞自身融合细胞仍然只能通过主要途径合成核酸 。
扩展资料:
筛选的原理和 *** :
细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键 。普遍采用的HAT选择性培养基:在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷酸(T) 。其依据是细胞中的DNA合成有两条途径:
一条途径是生物合成途径(“D 途径”),即由氨基酸及其他小分子化合物合成氨基酸,为DNA分子的合成提供原料 。在此合成过程中,叶酸作为重要的辅酶参与这一过程,而HAT培养液中氨基蝶呤是一种叶酸的拮抗物,可以阻断DNA合成的D途径 。
另一条途径是应急途径(“S途径”,它是利用次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核苷转移酶和胸腺嘧啶核苷激酶催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶生成相应的核苷酸,两种酶缺一不可 。

第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下:
1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的 ***,且一种抗原决定簇 *** 机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的 。
2、经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异,所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞 。
3、通常采用有限稀释克隆细胞的 ***,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞(理论上30%的孔中细胞数为0时,才能保证有些孔中是单个细胞),再由这些单细胞克隆生长,最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养 。
扩展资料:
筛选的原理与 *** :细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键 。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷酸(T) 。
其依据是细胞中的DNA合成有两条途径:一条途径是生物合成途径(“D途径”),即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸,为DNA分子的合成提供原料 。在此合成过程中,叶酸作为重要的辅酶参与这一过程,而HAT培养液中氨基喋呤是一种叶酸的拮抗物,可以阻断DNA合成的“D途径” 。
应急途径或补救途径(“S途径”),它是利用次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸,两种酶缺一不可 。
二:杂交瘤细胞的特点HAT培养基筛选杂交瘤细胞的原理 HAT 培养基是指含有次黄嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶呤(aminopterin)和胸 腺嘧啶脱氧核苷(thymidin)三种物质的细胞培养基 。扩展资料
培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质 。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质 。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的'生存环境 。培养基种类很多,根据配制原料的

推荐阅读