锐客网

  1. 首页 > 睿知 > >

southern结果分析

经验分享睿知

采用的实验方法有肿瘤细胞DNA和选择标记基因(neo)共转染、裸鼠致瘤性分析、Southern杂交、聚合酶链反应(PCR)和sequence 分析 。Chritian等人(2013)-1引入了突变菌株T.reeseiRutC30，其具有非常高水平的木聚糖酶表达(甚至在没有诱导物的情况下) 。

1、[甲醛致大鼠鼻腔癌与K-ras癌基因活化相关]K-ras摘要:为了探讨甲醛诱发大鼠鼻癌的分子机制，检测了甲醛诱发大鼠鼻癌细胞系FAT7中的转化序列 。采用的实验方法有肿瘤细胞DNA和选择标记基因(neo)共转染、裸鼠致瘤性分析、Southern杂交、聚合酶链反应(PCR)和sequence 分析 。结果表明 ， 第二轮裸鼠肿瘤DNA含有大鼠来源的Kras基因序列，但没有大鼠来源的Hras、Nras和p53基因序列 。

关键词:甲醛；老鼠:鼻癌；Kras:致癌基因中文分类号:R730文献识别码:A文号:1007-7847 (2006) 01-0071-06甲醛是一种工业用途广泛的化学物质，在人们的日常生活环境中也大量存在 。对甲醛致癌性的流行病学、毒理学和病理学研究表明，甲醛可引起染色体异常、基因缺失、基因突变和细胞转化，长期慢性吸入甲醛可诱发动物肿瘤等 。但甲醛致癌的具体机制尚不清楚，因此甲醛被列为潜在致癌物 。

2、这个实验的实验结果和 分析植物总DNA的提取 。472 。植物DNA的CTAB提取方法:1 。称取23g鲜叶，切成片，放入研钵中，在液氮中研磨成粉 。2.将粉末转移到15ml离心管中，离心管中有7ml预热的15×CTAB提取缓冲液，快速混合 ， 置于65℃水浴中30分钟 。3取出离心管 ， 冷却至室温，加入氯仿/异戊醇(24:1)，混匀，室温下2300×g离心20min 。

加入1/10体积的10% CTAB和等体积的氯仿/异戊醇 。充分混合并在2300×g下离心20min 。5将上清液转移到另一个新的15ml离心管中，加入同体积的1% CTAB沉淀缓冲液 ， 轻轻摇动，直至形成絮状DNA沉淀 。以1000×g离心10分钟，使DNA沉淀在试管底部 。6加入152ml 1mol/LNaCl和5μlRNase，置于56℃水浴中过夜 。

3、里氏木霉(T.reeseit里氏木霉(t reesei)是一种无性丝状真菌，是降解纤维素物质的重要丝状真菌之一，能分泌一整套降解纤维素的酶 。其中 ， 胞外葡聚糖和纤维二糖水解酶的产量最高，占胞外分泌蛋白总量的60%以上 。里氏木霉长期以来被用于生产纤维素酶、半纤维素酶和蛋白酶(王晓燕，2012年) 。里氏木霉具有典型的真核生物蛋白修饰特征和理想的蛋白分泌能力 ， 已被用作基因工程宿主菌株生产外源蛋白，并被基因修饰生产药用人源化蛋白，如N-糖基化途径的人源化改造 。

Chritian等人(2013)-1引入了突变菌株T.reeseiRutC30，其具有非常高水平的木聚糖酶表达(甚至在没有诱导物的情况下) 。研究发现 ， 由于编码木聚糖酶的Xyr1基因的单点突变 ， 内源性木聚糖酶的表达异常增加，并伴随着纤维素酶表达的增加 。这个突变位点通常位于双核锌簇的转录因子区域 。
4、基因组酶切不完全影响 southern结果么【southern结果分析】常规PCR法扩增目的基因的PCR技术的基本原理:该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核苷酸的存在下，依靠DNA聚合酶的酶促合成 。DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA，由一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的互补序列结合，形成部分双链，在适当的温度和环境下 ， DNA聚合 。

    推荐阅读


    上一篇：spss软件中分析频率,SPSS频率分析什么时候用

    下一篇：商品结构图分析法,层次分析法的层次结构图