ATAC-seq Topic-sheng Xin分析Process ATACseq Information分析Process主要分为以下几个部分:数据质量控制、序列比对、峰检测、模体分析、峰注释和富集 。用二代 测序的数据对三代转录组进行了定量,二,信息分析流量1,yield statistics 测序的原始序列数据将获得的原始图像数据转换为序列数据,我们称之为rawdata或rawreads,结果以fastq 文件的格式存储 。Fastq 文件是用户获得的最原始的文 。
1、小麦三代转录组融合基因定量第三代转录组序列一般较长 , 得到的是完整的全长转录本,在后处理过程中不需要组装,大大降低了错误率 。二代转录组测序得到的结果通常是中断的序列,长度在150bp左右 。一般质量控制后需要拼接 。对于重复序列多的多倍体物种,在拼接过程中容易造成拼写错误 。全长转录组测序技术的出现,为研究多倍体作物中全长转录物的信息提供了新的方法 。
第三代的两个常用平台测序(PacificBiosciences)和(OxfordNanopore) 。比较常用的是pacbio平台的实时单分子测序技术 。融合基因的鉴定比二代更准确 。在植物领域,对融合基因的研究很少,融合基因的定量软件系统也不成熟 。这篇文章记录了我对小麦融合基因的量化 。用二代 测序的数据对三代转录组进行了定量 。
2、kegg 分析是全部差异表达基因还是上调基因基因注释和差异表达基因方法1 。实验过程中提取样品总RNA后,用磁珠富集真核mRNA,磁珠上带Oligo(dT)(如果是原核生物,用试剂盒去除rRNA后进入下一步) 。加入fragmentationbuffer将mRNA断裂成短片段,以mRNA为模板,用六碱基随机六聚体合成第一条cDNA链,再加入buffer、dNTPs、RNaseH和DNApolymeraseI合成第二条cDNA链 。经QiaQuickPCR试剂盒纯化,EB缓冲液洗脱后,进行末端修复,加入A并连接测序接头,然后琼脂糖凝胶电泳选择片段大?。詈蠼蠵CR扩增 。构建的测序库是用IlluminaHiSeq?
二 。信息分析流量1 。yield statistics 测序的原始序列数据将获得的原始图像数据转换为序列数据,我们称之为rawdata或rawreads,结果以fastq 文件的格式存储 。Fastq 文件是用户获得的最原始的文件
3、ATAC-seq专题---生信 分析流程ATACseq information分析该过程主要分为以下几个部分:数据质量控制、序列比较、峰检测、motif 分析、峰注释、富集分析,下面将对各部分的内容进行说明 。对板外数据进行过滤以移除过多或低质量的读取,并为后续分析获得干净读取 。常见的trim软件有Trimmomatic、Skewer、fastp等 。Fastp是一个相对较新的软件 。使用时,可以使用adapter _ sequence/adapter _ sequence _ R2参数传入接头序列,也可以将这两个参数留空 , 软件会自动识别接头并切割 。
4、RNA-Seq数据 分析——原始数据质量控制(QC获得转录组数据后的第一步( 。fastq 文件)是为了控制原始数据的质量 。质量控制的目的是全面检查原始数据的质量,包括碱基质量评价、GC含量检验、N碱基数量评价、TCGA碱基分布、kmer数量检验等 。可以检查fastq 文件质量的软件有很多,比如FastQC、fastp、multiQC等 。本文主要介绍应用广泛的FastQC 。
FastQC可以使用conda安装 。只需在linux环境下运行命令condainstallfastqc,运行结果如下 。运行命令fastqch检查是否安装成功,运行结果如下 。使用fastqco#输出结果完整路径#数据存储完整路径/*reads_R1 。fq命令运行案例数据,可以得到以下结果 。报告的第一部分不仅是质检结果的基本信息统计,如上图所示 。
5、DamID-seq 分析笔记(一1:Illumia machine测序is 3 > 5的方向 。附一张图:我是适配器:PE150 测序的GATCGGAAGA,第一次看数据 。先来看看吧 。我打开a fq 文件看一下:illumia机测序的方向是35 。从这个角度来看,trim之后的一些读取在长度上会更短 。
6、使用RSEM进行转录组 测序的差异表达 分析如果通过RSEM比较来量化bam的转录,则有必要确保比较中使用的指数是由rsempreparereference生成的 。如您所见 , 简单使用bowtie2创建的索引不同于rsem调用bowtie2创建的索引 。用法可以分为两类,一类是从fa/ fq获得的表达式矩阵,另一类是从sam/bam获得的表达式矩阵(仍需与rsempreparereference生成的索引进行比较) 。
【二代测序 fq文件分析,测序fq文件用什么程序打开】这些文件是在完成后获得的,其中rsem.genes.results和rsem.isoforms.results分别代表基因水平和转录水平的定量结果 。各列含义:这两个文件在后面用EBseq查差异基因/转录本时会用到,我们以基因水平的差异分析为例 。本步骤提取上一步得到的每个样本的定量结果文件中的expected_count列,形成数据矩阵 。
推荐阅读
- php7源码分析,tomcat源码分析
- 层次分析法简单案例ppt,选择旅游地层次分析法案例
- 大数据舆情分析
- 怎么检查服务器速率慢原因 怎么查服务器tps低
- 大悦城数据分析,朝阳大悦城app数据分析
- 层次分析法几大步骤,spss层次分析法步骤
- 压铸模模流分析
- 芯片产品失效模式分析,FIB分析失效芯片方法
- asynctask分析,安卓AsyncTask