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如何测定牛奶中蛋白质含量，要具本步骤.原理和方法，知道的说下，谢谢
实验原理：蛋白质是一种含氮的有机化合物。用食用硫酸和催化剂加热消化分解蛋白质，分解的氮气与硫酸结合生成硫酸铵。然后用碱蒸馏游离氨，用硼酸吸收，用硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据耗酸量乘以换算系数，即为蛋白质含量。实验及试剂(1)固氮蒸馏装置(2)硫酸铜(3)硫酸钾(4)浓硫酸(5) 2%硼酸溶液(6)混合指示剂：使用前将1份0.1%甲基红乙醇溶液和5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液混合。也可以在使用前将2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%亚甲蓝乙醇溶液混合。(7) 40%氢氧化钠溶液。(8) 0.05N硫酸标准溶液或0.05N盐酸标准溶液。实验步骤(1)样品制备准确称取0.2~2.0g固体样品，移入干燥的100mL或500mL氮气瓶中，加入0.2g硫酸铜、3g硫酸钾和20mL硫酸，轻轻摇匀，在瓶口放一个小漏斗，在有孔的石棉网上以45倾斜瓶子。小心加热。待所有内容物碳化，泡沫完全停止后，加强火力，保持优质瓶中液体微沸。当液体呈蓝绿色透明后，继续加热0.5小时，取出冷却。小心地加入20毫升水。冷却后移入100mL容量瓶中，用少量水洗涤氮气瓶，将洗涤液合并到容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。取等量的硫酸铜、硫酸钾和硫酸作为处理后的样品，按同样的方法做试剂空白试验。(2)将固氮装置接入蒸汽发生器瓶中约2/3的水中，加入几滴甲基红指示剂和几毫升硫酸，使水保持酸性，并加入几粒玻璃珠防止沸腾。蒸汽发生器瓶中的水在压力调节器的控制下被加热和煮沸。(3)样品测定：在接收瓶中加入10mL 2%硼酸溶液和1滴混合指示液，将冷凝管下端插入液面，从小玻璃杯中吸取10.0mL样品消解稀释液到反应室中，用10ml水冲洗小烧杯使其流入反应室，塞住小玻璃杯的棒状玻璃塞。将10ml 40%的氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯中，提起玻璃塞使其缓慢流入反应室，立即将玻璃塞盖紧，并向小玻璃杯中加水，以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏。将蒸汽通入反应室，使氨气通过冷凝管进入接收瓶，蒸馏5分钟。移动接收瓶，使冷凝管下端离开液面，然后蒸馏1分钟。然后用少量水清洗冷凝管下端的外侧。取下接收瓶，用0.05N硫酸或0.05N盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色。7结果计算7.1 Calculate(v1-v2)n0.014 X=———————f100m10100，其中：X—样品中蛋白质的含量，%;V1 ——试样所消耗的硫酸或盐酸标准溶液的体积，ml；V2——试剂空白所消耗的硫酸或盐酸标准溶液的体积，毫升(ml)；n——硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度；1毫升0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液相当于克氮；M—样品的质量(体积)，g(毫升)；f——氮转化为蛋白质的系数。蛋白质中的氮含量一般为15 ~ 17.6% 。如果以16%乘以6.25计算，就是蛋白质，花生是5.46 。
鉴定牛奶中含有蛋白质的方法是（）A加碘液B加入质量分数为.的高锰酸钾溶液C
试题C解析：食物中是否含有蛋白质或蛋白质可以用双缩脲试剂检测。在碱性溶液中，缩二脲试剂能与蛋白质反应生成红棕色的复合物。由于蛋白质分子中含有许多与缩二脲结构相似的肽键，在蛋白质中加入缩二脲试剂会产生红棕色现象，因此可以用缩二脲试剂检测蛋白质。点评：这是一个基础题，难度一般。解决这个问题的关键是熟悉用缩二脲试剂检测蛋白质。
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凯氏定氮法1 。原理样品用硫酸和催化剂加热，然后消化，蛋白质分解，其中的碳和氢被氧化成二氧化碳和水蒸气逸出，而有机氮转化成氨再与硫酸化合生成硫酸铵，然后在碱性条件下蒸馏使氨游离，用硼酸吸收，再用硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，得到蛋白质的含量。(1)消化：将样品与硫酸混合催化剂混合，加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，溶解于消化液中。(2)蒸馏吸收：消化液中加入过量的氢氧化钠，然后用水蒸气蒸馏硫酸铵，放出氨，再用硼酸吸收，使氨转化为四硼酸铵。消化液中加入氢氧化钠，会产生蓝色溶液或棕色沉淀，这是由于消化液中的铜离子与氨反应生成铜氨络合离子或与碱反应生成氢氧化铜。这是正常现象。否则，如果颜色一样，说明加的碱不够，要补，否则会造成氨的残留损失。(3)滴定：用标准盐酸溶液滴定硼酸吸收液(即四硼酸铵)，测氮含量，然后乘以相应的蛋白质系数，计算出样品的蛋白质含量。牛奶和奶制品：6.38英镑

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酸碱滴定法牛奶中的蛋白质原理步骤？
牛奶中酪蛋白和乳糖的分离。引言牛奶中的主要蛋白质是酪蛋白，其含量约为35g/L，在酪蛋白牛奶中，存在酪蛋白酸钙-磷酸钙复合胶体颗粒，胶体颗粒直径约为20 ~ 800 nm，平均为100 nm 。酪蛋白在酸或凝乳酶的作用下会沉淀，加工后可制成奶酪或干酪素。在这个实验中，当酪蛋白的等电点通过加酸达到PH=4.7时，酪蛋白沉淀。脱脂乳除去酪蛋白后，剩下的液体就是乳清，乳清中含有乳清蛋白、乳球蛋白和溶解的乳糖。牛奶中99.8%以上的糖是乳糖，可以通过浓缩结晶制得。二。实验材料和试剂脱脂牛奶或脱脂奶粉。乙酸-乙酸钠缓冲溶液(PH=4.7)、95%乙醇、乙醚、碳酸钙粉末、苯肼试剂。3.实验步骤1 。将酪蛋白从牛奶中分离出来，在烧杯中加入2g脱脂奶粉，然后加入40ml 40、PH=4.7的醋酸-醋酸钠缓冲溶液，用PH精密试纸检查液体的PH值。静置至室温，倒出上清液(留作乳糖分离用)，将剩余的悬液放入两个离心试管中，用2000 rpm旋转的离心分离中心分离3-5分钟，倒出上清液，(与前面的上清液合并)得到粗酪蛋白。向离心管中加入5ml蒸馏水，用玻璃棒充分搅拌，洗涤除去水溶性杂质(如乳清蛋白、乳糖和残留缓冲液)，离心弃去上清液，再用蒸馏水洗涤。向试管中加入5ml 95%的乙醇，充分搅拌，离心，弃去乙醇溶液。用乙醇洗涤主要去除磷脂。最后用5ml乙醚用同样的方法洗去脂肪物质。干燥酪蛋白沉淀，称重并计算产率。2.从牛奶中分离乳糖。向除去酪蛋白的乳清中加入1.5g CaCO3粉末，搅拌均匀，然后加热至沸腾。加入CaCO3的目的一方面是中和溶液的酸性，防止加热时乳糖水解，另一方面是沉淀乳清蛋白。过滤除去沉淀物，在滤液中加入1 ~ 2个沸石颗粒，加热浓缩至3 ~ 5 ml，加入10ml 95%乙醇(远离火焰)和少量活性炭，搅拌均匀，水浴加热至沸腾，趁热过滤。滤液必须澄清。静置过夜，结晶乳糖，过滤，用95%乙醇洗涤产物。3.乳糖形成试验：将自制乳糖溶于少量浓度约为5%的水中，在试管中加入1ml乳糖溶液和1ml苯肼试剂，摇匀，用棉花塞住试管口，沸水浴加热，并不时摇动。加热10 ~ 15分钟后，取出冷却，乳糖会结晶析出。取少量乳糖，在显微镜下观察其晶型，可确认为乳糖。苯捕集剂有毒，慎用，不要接触皮肤。如果接触到皮肤，先用稀醋酸清洗，然后用水清洗。附：蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤：(1)材料预处理和细胞破碎。当分离和纯化某种蛋白质时，首先，蛋白质应该从组织或细胞中释放出来，并保持其原始的自然状态，而不丧失其活性。因此，应采用适当的方法破碎组织和细胞。常用的组织细胞破碎方法如下：1 。机械破碎法该方法利用机械力的剪切作用来破碎细胞。常用设备包括高速组织捣碎器、匀浆器、研钵等。2.渗透破坏。这种方法在低渗透条件下膨胀和破坏细胞。3.生物组织经过反复冻融冷冻后，胞内液冻结膨胀，使细胞破裂。这种方法简单方便，但需要注意的是不适用于对温度变化敏感的蛋白质。4.超声波法利用超声波振动器使细胞膜上的张力不均匀，从而使细胞破裂。5.酶法，如用溶菌酶破坏微生物细胞等。(2)蛋白质的提取通常选择合适的缓冲溶剂来提取蛋白质。用于提取的缓冲液的pH值、离子强度、组成和其他条件应根据
在提取过程中，应注意温度，避免剧烈搅拌，以防止蛋白质变性。(3)获得蛋白质粗品；选择合适的方法将所需的蛋白质与其他杂蛋白分离。一种方便有效的方法是根据蛋白质的溶解度差异进行分离。常用的方法有：1 。等电点沉淀法不同于蛋白质的等电点沉淀法，因此可以用等电点沉淀法将它们彼此分离。2.不同的盐析方法要求蛋白质中的盐饱和度不同，因此可以通过调节盐浓度来沉淀目的蛋白。盐析沉淀的蛋白质仍保持其天然性质，可以再次溶解而不变性。3.有机溶剂沉淀法乙醇、丙酮等中性有机溶剂的介电常数比水低。它可以降低大部分球状蛋白在水溶液中的溶解度，然后从溶液中沉淀出来，所以可以用来沉淀蛋白质。另外，有机溶剂会破坏蛋白质表面的水合层，使蛋白质分子变得不稳定而沉淀。由于有机溶剂能使蛋白质变性，使用该方法时，应注意低温操作，选择合适的有机溶剂浓度。(四)样品的进一步分离纯化等电点沉淀盐析得到的蛋白质一般含有其他蛋白质杂质，只有进一步分离纯化才能得到一定纯度的样品。常用的纯化方法有凝胶过滤层析、离子交换纤维素层析、亲和层析等。有时，需要结合这些方法来获得高纯度的蛋白质样品。
从牛奶中分离出蛋白质的方法
使用缩二脲试剂。取少量牛奶，先加入0.1摩尔/升NaOH溶液，再加入0.01摩尔/升硫酸铜溶液。如果出现紫色反应，说明牛奶中含有蛋白质。

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如何用简单方法证明牛奶有没有蛋白质？
【牛奶做蛋白质鉴定如何稀释溶解牛奶做蛋白质鉴定如何稀释，牛奶做蛋白质鉴定如何稀释的】1.取适量牛奶，加入过量硫酸铵，直至形成大量沉淀；然后过滤，用适量蒸馏水冲洗滤纸2-3次。3.将洗涤后的蛋白质沉淀转移到试管或燃烧的被子中，再加入适量的水溶解，即为高纯度的蛋白质水溶液。