锐客网

  1. 首页 > 生活杂烩 > 健康 > >

新冠病毒|欧洲疫情卷土重来，新冠病毒糖基化研究不可忽视

新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的大流行已迅速成为全球的社会经济危机 。截止目前，SAR-CoV-2 病毒在全球已感染了超 3,000 万人，并导致近 100 万人死亡 。
病毒表面的刺突蛋白（S 蛋白）与宿主细胞表面的血管紧张素转化酶 2（ACE-2）结合，以启动感染 。S 蛋白由两个功能亚基（S1 和 S2）组成 。S1 包含受体结合结构域（RBD），让病毒初步附着到宿主细胞表面，而 S2 负责膜的融合，使得病毒进入宿主细胞 。
【新冠病毒|欧洲疫情卷土重来，新冠病毒糖基化研究不可忽视】S 蛋白不可忽视的糖基化修饰
每个 S 蛋白有 22 个 N-连接糖基化位点和至少 2 个 O-连接糖基化位点，被来源于宿主的多糖广泛糖基化[1-3] 。当后代病毒颗粒形成时，病毒通过挟持宿主细胞内质网-高尔基体中间室的糖基化机制来实现糖基化 。因此，S 蛋白虽然有其独特的糖基化位点，但也带有宿主细胞的糖基化模式特征 。
SARS-CoV-2 S 糖蛋白结构示意图，含 22 个 N-糖基化位点[2] 。
S 蛋白的糖基化有助于增加蛋白的稳定性和溶解度 。更重要的是，糖基化可以掩饰蛋白的免疫原性表位，从而使病毒逃避宿主免疫反应的能力得以增强 。S 蛋白不仅是疫苗开发的主要靶点，也是血清学检测的重要成分 。
为了促进 SARS-CoV-2 诊断和治疗的研究，R&D Systems的研究团队已在几种常用的宿主细胞系（HEK293 细胞、CHO 细胞和 Sf21 细胞）中表达 S 蛋白的 RBD 。不同的宿主细胞具有独特的糖基化能力，因此它们表达的 RBD 蛋白有望表现出不同的糖基化特征 。我们利用之前开发的聚糖直接荧光标记（DFGL）工具来分析糖基化[3]，为不同目的下选择最相关的 RBD 重组蛋白提供了快速指引 。
不同表达体系，RBD 糖基化特征大不同
1.O-连接糖基化
为了研究刺突 RBD 蛋白的各种聚糖结构，我们首先利用 O-聚糖特异性的唾液酸转移酶 ST3 Gal1，通过 ST3 Gal1 加入 Cy5 荧光标记的唾液酸，使得 O-聚糖可通过荧光成像仪轻松检测 。
分别检测经过产气荚膜梭菌神经氨酸酶（Neu）或内切糖苷酶（EF）预处理及未经过预处理的 O-聚糖：神经氨酸酶去除糖蛋白上现有的末端唾液酸残基，并打开 O-聚糖上的位点，以便 ST3 Gal1 加入 Cy5 标记的唾液酸（Fig 1C 下） 。内切糖苷酶 EF 是一种 O-糖苷酶，能够有效去除 O-聚糖简单的 Core-1 结构，但复杂的 Core-2 和 Core-3 结构不受影响（图 1C 上） 。
新冠病毒|欧洲疫情卷土重来，新冠病毒糖基化研究不可忽视
文章图片


助力新冠研究，5 折大放送
2020 年 9 月 21 日 ~ 2020 年 10 月 23 日期间，购买 Bio-Techne 旗下 R&D Systems、Novus Bioglogicals、Tocris新冠研究主题指定明星蛋白、抗体、小分子及 Valukine 特色新品，即可享受 5 折特惠！
活动规则：
本活动仅限中国大陆地区终端客户
下单请使用备注 5 折促销码：MKT1202009007TH
指定促销产品见下方表格
本促销不与其他特价及促销共享
本活动最终解释权归 Bio-Techne
（上下滑动查看）
新冠病毒|欧洲疫情卷土重来，新冠病毒糖基化研究不可忽视
文章图片


参考文献：
1. Shajahan A, et al. 2020. Deducing the N- and O- glycosylation profile of the spike protein of novel coronavirus SARS-CoV-2. Glycobiology.
2. Watanabe Y, et al. 2020. Site-specific glycan analysis of the SARS-CoV-2 spike. Science.
3. Wu ZL, et al. 2019. Direct flu- orescent glycan labeling with recombinant sialyltransferases. Glycobiology, 29: 750-754.
图文来源：Bio-Techne
题图来源：站酷海洛

    推荐阅读


    上一篇：结直肠癌|迷你口头报告：消化道结直肠癌研究进展盘点

    下一篇：阿尔茨海默病|中年人注意，不正常的“健忘”需警惕！